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血清蛋白電泳即用電泳方法測定血清中各類蛋白占總蛋白的百分比。下面詳細介紹血清蛋白電泳操作步驟及注意事項。血清蛋白電泳操作步驟1、開機,啟動電泳儀。2、將1個(用于7PROTEIN或用于15RPOTEIN)或2個(用于30PROTEIN)加樣梳置于平板上,有數字的一端向上,在2分鐘內完成每塊加樣梳的加樣,每孔加10ul樣品,然后齒梳向上把加樣梳放于濕盒內5分鐘。3、選擇相應的電泳程序,使用HYDRAGEL7PROTEIN(E)時選擇儀器的“PROTEIN7”電泳程序,使用HYD...
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bca法測蛋白濃度原理工作液為BCA與二價銅離子的硫酸銅等其他試劑,混合一起顏色變為蘋果綠,即為BCA工作試劑。在堿性條件下,BCA工作液與蛋白質結合時,蛋白質將二價銅離子還原為一價銅離子,一個一價銅離子螯合兩個BCA分子,工作試劑由原來的蘋果綠變成紫色,在562nM處有高的光吸收值,并與蛋白質濃度成正比,據此繪制標準曲線,檢測蛋白的OD值,即可得到濃度值。bca法測蛋白濃度步驟步驟標準曲線的繪制:反應體系加樣:96孔板,第一列8個孔PBS:20ul19ul18ul16ul1...
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蛋白質提取與制備蛋白質種類很多,性質上的差異很大,既或是同類蛋白質,因選用材料不同,使用方法差別也很大,且又處于不同的體系中,因此不可能有一個固定的程序適用各類蛋白質的分離。本文分別介紹了從新鮮樣品中提取總蛋白和從Trizol裂解液中分離總蛋白的方法和步驟。希望與各位老師和同學交流。膜蛋白具有多種功能,在細胞識別、細胞信號轉導、運輸等有著中著重要的角色,因此也是很好的藥物靶點。抽提膜蛋白主要是進行蛋白組分析:常用的實驗是非變性膠電泳、酶活分析、SDS-PAGE、western...
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本篇文章詳細介紹了單層貼壁細胞總蛋白的提取方法和步驟,僅供參考。另外索萊寶公司提供細胞總蛋白提取試劑盒,更加方便老師和同學順利完成單層貼壁細胞總蛋白的提取實驗。1.倒掉培養液,并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養液(或將瓶直立放置一會兒使殘余培養液流到瓶底然后再用移液器將其吸走)。2.每瓶細胞加3ml4℃預冷的PBS(0.01MpH7.2~7.3)。平放輕輕搖動1min洗滌細胞,然后棄去洗液。重復以上操作兩次,共洗細胞三次以洗去培養液。將PBS棄凈后把培養瓶置于冰上。3.配制...
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索萊寶基質膠的儲存需要嚴格控制溫度、避免反復凍融,并注意環境穩定性,以確保其生物學活性和功能不受影響。以下是具體的儲存要求:1.長期保存溫度-80℃冰箱是理想的長期儲存條件,可最大限度維持基質膠的穩定性和活性。若短期內使用,也可暫存于-20℃冰箱,但需減少頻繁開啟冰箱門的次數以保持低溫環境穩定。2.禁止使用的冰箱類型切勿將基質膠存放在具有自動除霜功能的冰箱中。這類冰箱的溫度波動可能導致基質膠提前成膠或降解,影響實驗效果。建議選擇非除霜型且溫度穩定的專用冷藏設備。3.分裝保存原...
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生物大分子的貯藏保存可分為干態和液態貯藏兩種。所以蛋白保存也有干態保存和液態保存兩種。但是蛋白保存條件卻受多種因素的影響,今天分析的就是影響蛋白保存條件的因素。蛋白質失活受多種理化因素的影響,主要有空氣、溫度、水分、光線、酸堿度、樣品狀態、微生物活動、保存時間和容器等。這些因素可單獨起作用,但更多情況是協同作用。那么蛋白保存條件也比如會受到這些方面的影響。下面選擇其中幾項做詳細分析。1.空氣空氣的影響主要與潮解、微生物污染及自動氧化等有關。空氣中的微生物污染可導致樣品腐敗變質...
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