透析袋 扁寬31截留分子量100-500 耗材
貨號：YA1069
規格：0.5m/即用型

使用前處理：

1. 把透析袋剪成適當長度（10-20cm）的小段。

2. 在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。

3. 用蒸餾水*清洗透析袋。

4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。

5. 冷卻后，存放于4度，必須確保透析袋始終浸沒在溶液內。從此時起取用透析袋是必須戴手套。

6. 用前在透析袋內裝滿水然后排出，將之清洗干凈。

透析袋寬度：31mm

截留分子量：100-500D

長度：0.5米

材質：再生纖維素

使用前只需用水漂洗，即可去除膜表面的防腐劑。

應用

• 去除鹽分、表面活性劑以及溶劑

• 緩沖液置換或 pH 值調整

• 蛋白質、多肽或抗體濃縮

• DNA電洗脫

• 電泳前蛋白質準備

• 去除小分子雜質

• 親和研究（受體-配體結合研究）

• 組織培養物的提取純化

    對樣品進行透析之前，需要考慮諸多因素。影響透析效率的一些因素包括樣品溶質、膜化學相容性、膜截留分子量、透析緩沖液性質、透析體積、溫度等。因此，有必要針對下列透析程序作一些優化。

透析參數和截留分子量的選擇

樣品和透析溶液濃度
    一般除要保留的大分子產品和要去除的雜質外保持* 
    樣品/透析液使用量比例
    常用 1 : 50 - 500 體積比
    膜截留分子量 /MWCO 
    要保留分子量的50-90%
    樣品體積和透析膜面積比例
    長度 (10-15 厘米) x FW (24-30 毫米) , 2-5 ml/cm
    溫度
    常用室溫 (20-25 C) “靜態” 透析并配合攪拌 
    溶液置換間隔
    3 次：  3-4 小時, 6-8 小時 & 16-24 小時

 透析時間
1 – 2 天

實驗室透析 常見問題解答

Q1：如何準備透析膜管？
透析膜管的準備因膜管材質和生產工藝的差別而有所不同。

注意，我們不推薦煮沸處理，因其可能損壞膜管并改變膜孔徑。
A) 生物技術級 RC、CE 及 PVDF 膜可以用 DI 水沖洗 15-30 分鐘，去除防腐劑。
B) Spectra/Por ○
R 7 標準級 RC 膜已經預處理，去除了重金屬和硫化物，只需在去離子水中浸泡 15-30 分鐘，去除防腐劑即可。
C) Spectra/Por ○
R 1-6 標準級 RC 膜，一般情況下，在水中漂洗足以去除甘油或防腐劑，而對于親和研究之類極其敏感的透析應用或者重金屬及硫化物會影響透析樣品下游分析的應用，可能需要一些額外的處理以去除在生產過程中引入的痕量水平重金屬及硫化物，索萊寶提供兩種膜預處理溶液：重金屬漂洗液及硫化物清除液，具體產品信息請參考“膜透析配件”網頁說明。

Q2：透析的原理是什么？一般需要多長時間才能完成？
    透析是指溶質在濃度梯度的驅使下，選擇性擴散通過半透膜，從而達到大/小分子分離，膜兩側濃度平衡，即小顆粒的溶質通過膜，而大分子物質不能通過，被截留在膜另一邊。
如果將樣品置于透析膜管內，通過置換膜管外部的透析緩沖液，可將小顆粒物質清除，從而
達到純化大分子物質的目的。一般來說，之內置換 3-5 次緩沖液，然后在室溫條件下，
放在攪拌臺上隔夜透析，即可達到高效的透析結果。標準的透析操作一般需要 16-24 小時。
許多因素會影響透析效率，包括：擴散系數、pH 值、溫度、時間、物質濃度、樣品體積、
透析緩沖液體積、透析緩沖液的置換次數、膜表面積、膜厚度、分子帶電荷及緩沖液攪拌速
率。

Q3：透析一個樣品需要多少體積的透析緩沖液？緩沖液置換頻率怎么安排？
    透析緩沖液的體積越大，小分子擴散的驅動力越大。我們一般推薦緩沖液和樣品的體積比為100:1。當擴散速率降低，膜兩側溶液趨于平衡時，通過置換緩沖液，可維持小分子擴散驅動力和透析速率。我們一般推薦在 12-24 小時內，置換緩沖液 2 到 3 次，具體安排如下：*次緩沖液置換：透析開始后 2-3 小時第二次緩沖液置換：透析開始后 4-5 小時
后一次緩沖液置換：透析隔夜之前

Q4：如何選擇正確的截留分子量（MWCO）？
     截留分子量應該竟可能的大，以使透析速率大化。但是，為了獲得大的樣品回收率，選擇的截留分子量應少為需純化的大分子物質分子量的一半。對于需對幾種分子進行分離的應用，分子之間的分子量差少為 5 倍，才能完成有效的膜透析。若不能滿足分子量差的要求，可能需要使用其它的分離技術，如色譜方法或切向流過濾。

Q5：那種膜的蛋白質結合率低？
    每種膜對不同的分子具有不同的親和性。對于球狀蛋白，相對的結合親和性由低到高為 CE<RC<PVDF。

Q6：怎樣為膜管選擇合適大小的膜夾？
    標準 RC 膜(Spectra/Por 1-7)和生物技術級 RC 膜由柔韌的再生纖維素聚合物制造，可使用任何一種透析膜夾密封。生物技術級 CE & PVDF 膜由相對剛性的聚合物制造，需要使用相對溫和的通用膜夾。鑒于通用膜夾對于所有類型的膜管都能起到很好的密封作用，如不確定選擇哪種膜夾合適，使用通用膜夾即可。標準膜夾一般只用于標準級 RC 膜管。
    膜夾的密封寬度一般需比膜管的扁平寬度長 4-10 mm。通用膜夾的小密封寬度為 50 mm。對于所有扁平寬度規格的仕必純生物技術級膜管，均有相應的膜夾可供選擇。

Q7：透析膜的保存時間為多長？
     干包裝的透析膜可保存 5 年。濕包裝的透析膜（0.1% 的防腐劑溶液）保存期限為 3 年。輻照滅菌的透析膜可保存 1.5 年。

Q8：透析膜變干或凍存之后是否仍可使用？
     濕潤的透析膜變干之后，孔徑受到不可逆的影響，膜變得脆弱易碎，容易泄露，不推薦繼續使用。透析膜凍存之后，冰晶會使膜破裂，導致泄露，此時不推薦使用該膜。

Q9：透析膜*不含內毒素嗎？
    仕必純確認所有透析膜不含有內毒素，符合普通實驗室使用規格要求。

Q10：我需要擔心透析膜上的皺紋、滾痕或折線嗎？
    只要膜是完整的，滾痕或者折線不會影響膜的擴散特性。

Q11：CE 膜比 RC 膜更具剛性，且不透明嗎？
    纖維素酯（CE）膜內的聚合物交聯形成相對剛性的晶格，而再生纖維素（RC）聚合物形成更加柔韌的網格結構。不透明性是由網格中孔眼的大小所決定的，孔眼越大，膜越不透明。

Q12：透析膜可以化學密封或熱密封嗎？
    CE 和 RC 透析膜只能機械密封，但 PVDF 透析膜可以機械密封或熱密封，通常用于樣品“封裝”目的。

Q13：處理相同的蛋白樣品，Spectra/Por ○R 透析膜可重復使用嗎？
    我們不推薦重復使用透析膜，因為特定的處理操作可能會對膜造成污染，一定的透析條件（pH 值、溫度、化學接觸等）也會對膜的完整性造成損害，和/或導致泄漏，特別是在打開和重新夾上膜夾時。

Q14：膜孔徑有多，什么是 MWCO？
     透析膜微觀下呈海綿狀結構，因此，更適合通過評定其截留性能來間接地定義“孔徑”，亦即“截留分子量”（Molecular Weight Cut Off，MWCO）。MWCO 定義為在 17 個小時內，膜截留率為 90%的溶質分子量。基于此定義，選擇透析膜時，MWCO 應小于需要截留的分子的大小。

Q15：透析膜 Spectra/Por ○
R 2 和 4 有什么區別？
Spectra/Por ○
R 2 和 4 都有 12-14 kD 的截留分子量。Spectra/Por ○ R 透析膜更適合溫和透析，
Spectra/Por ○
R 2 可提供特定的更大和更小的扁平寬度，和/或滲透性；也就是說，Spectra/Por ○ R
2 的水滲透性比 Spectra/Por ○
R 4 更*。

Q16：關于膜表面積和樣品量之間的關系有沒有經驗法則？
    表面積與體積的比值取決于膜管扁平寬度。如果有兩段相同長度的膜管，扁平寬度較小的膜管具有較高的比表面積，而扁平寬度較大的膜管比表面積相對較小，也就是說，前者的透析速率更快。原因是扁平寬度較小的膜管，溶質的擴散距離較短，溶質之間通過膜孔的競爭也較小。而扁平寬度大，亦即溶質到達膜表面的距離也較長，溶質之間對膜孔的競爭也較大。一般而言，比表面積越大，透析越快。

Q17：如果膜兩側的摩爾滲透壓濃度相等，但濃度梯度仍然存在，物質的通過效率如何？
    大多數透析結束時膜兩側滲透壓相同。透析過程是由膜管內外兩側的濃度梯度驅動的。如果滲透壓力有很大的差別，水會通過膜以平衡膜兩側的滲透壓。如果過多的水通過膜，透析膜管可能會隨水運動的方向增大或縮小，在體積增加到一定程度時，有可能導致膜夾松動或膜管破裂。

Q18：進行超濾時，透析膜能承受多大的壓力？
    透析膜設計不適合用于壓力過濾。在不影響截留分子量的前提下，大推薦壓力為 1.5 psi。

Q19：一般推薦使用哪種透析液（緩沖液）？
    生物分子必須保存在嚴格的 pH 值控制條件下，以穩定其分子極性。典型的透析緩沖液 pH范圍為 6-8。以下為常用的幾種可以作為緩沖液的生化溶液：
?  水
?  PBS
?  TBS
?  HEPES
?  氨基酸緩沖液

Q20：為什么使用微米 vs 道爾頓（MW）單位，怎么轉換？
     溶解的分子大小以分子量來定義，單位為道爾頓，而顆粒和細胞大小常以直徑來定義，由于分子的結構和形態不同，相同分子量的物質，分子大小和形態可能相差較大，兩者之間沒有的對應關系。出于這個原因，許多常見的生物材料都已特別定性，并將大約的尺寸標注在轉換表上作為估算的參考，以用于透析、超濾和微濾應用。道爾頓與微米單位之間的轉化，請參考索萊寶“孔徑表”。

Q21：對于鹽濃度較高的樣品，佳的透析方法是什么？

     如果可能，我們推薦使用低鹽濃度的緩沖液。不推薦直接使用純 DI 水作為緩沖液，因為滲透壓力可能將水引入膜管，使樣品體積膨脹并可能導致膜管破裂。使用一系列濃度逐漸降低的溶液作為緩沖液可防止滲透壓力導致的膜管膨脹。每次緩沖液置換，可將溶質濃度降低十分之一，也就是說，透析一個 5M NaCl 的樣品，可使用 500 mM NaCl 的緩沖液。

Q22：可以使用繩子結扎膜管，而不使用膜夾嗎？
    我們不推薦使用繩子結扎膜管。因為繩結對膜管的損害具有很大的不確定性，并且可能不能提供有效的密封，而導致泄露。只有膜夾才能提供足夠的密封性，從而保護樣品。

Q23：透析膜管應該剪多長？
    對于每種膜管扁平寬度，仕必純提供相關的容積/長度比，可方便計算透析樣品所需的膜管長度。如果扁平寬度為 16 mm，容積/長度比為 0.79 ml/cm，要容納 5 ml 的樣品，則需要大約 6.5 cm 長的膜管。但是，為保持樣品漂浮，一般需要在頂部空間預留 10-20%膜長（約為1 cm）。此外，也需在兩端為膜夾各預留 2 cm。所以總的膜管長度應少為 11.5 cm。
可根據以下公式計算膜管長度：
    總長度=（樣品體積）/（容積/長度）+（額外的 10-20%）+4 cm
    瀏覽網頁，使用仕必純透析膜管計算器，根據樣品體積和扁平寬度，計算所需的膜管長度。

實驗室耗材

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YA1043    透析袋 扁寬32  截留分子量10000    Solarbio    0.5m/即用型
YA1044    透析袋 扁寬32  截留分子量15000    Solarbio    0.5m/即用型
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YA1054    透析袋 扁寬45  截留分子量3500    Solarbio    0.5m/即用型
YA1055    透析袋 扁寬50  截留分子量8000    Solarbio    0.5m/即用型
YA1056    透析袋 扁寬18  截留分子量5000    Solarbio    0.5m/即用型
YA1057    透析袋 扁寬30  截留分子量5000    Solarbio    0.5m/即用型
YA1058    透析袋 扁寬40  截留分子量5000    Solarbio    0.5m/即用型
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YA1071    透析袋MD25(8000-14000)D    Solarbio    5M
YA1072    透析袋MD34(8000-14000)D    Solarbio    5M
YA1073    透析袋MD44(8000-14000)D    Solarbio    5M
YA1074    透析袋MD55(8000-14000)D    Solarbio    5M
YA1075    透析袋MD77(8000-14000)D    Solarbio    5M
YA1076    透析袋MD34 ( 7000 D )    Solarbio    5M
YA1077    透析袋MD34 ( 3500 D )    Solarbio    5M
YA1078    透析袋MD44 ( 3500 D )    Solarbio    5M
YA1080    透析袋MD25(3500D )     Solarbio    5M
YA1081    透析袋MD25(7000D )     Solarbio    5M
YA1082    透析袋MD44(7000D )     Solarbio    5M
YA1083    透析袋MD55(3500D )     Solarbio    5M
YA1084    透析袋MD55(7000D )    Solarbio    5M

 透析袋 扁寬31截留分子量100-500 耗材

參考文獻：
《Antioxidant Activities of Rapeseed Protein Hydrolysates》 作者:Mu Pan， Tong S. Jiang，Jun L. Pan 期刊:Food and Bioprocess Technology 影響因子:2.998 PMID:
《Silicon-doped carbon quantum dots with blue and green emission are a viable ratiometric fluorescent probe for hydroquinone》 作者:Yingnan Liu，Yuanyuan Cao，Tong Bu，Xinyu Sun，Taotao Zhe，Chen Huang，Siyu Yao，Li Wang 期刊:Microchimica Acta 影響因子:5.479 PMID:31183545

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